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微流控單細(xì)胞包封系統(tǒng)
點(diǎn)擊次數(shù)：782 更新時(shí)間：2022-12-07
 

微液滴的單細(xì)胞包封是采用微流控系統(tǒng)生成微液滴進(jìn)行單細(xì)胞包封的技術(shù)，采用壓力控制器驅(qū)動(dòng)的微流控裝置可生產(chǎn)皮升級(jí)大小的液滴，可在單細(xì)胞水平上進(jìn)行Hela等細(xì)胞的包封及進(jìn)一步的分析。Elveflow 提供微流控單液滴包封的全套儀器設(shè)備及相關(guān)的用戶(hù)指導(dǎo)手冊(cè)，用于微液滴的單細(xì)胞包封及單細(xì)胞測(cè)序。

微流控單細(xì)胞包封的應(yīng)用包括:

腫瘤學(xué)（洞察小細(xì)胞亞群攜帶的突變）

免疫學(xué)（區(qū)分不同的免疫細(xì)胞群或表征免疫細(xì)胞群）

神經(jīng)學(xué)（獲取詳細(xì)的單細(xì)胞圖譜，以了解和識(shí)別大腦中不同類(lèi)型的神經(jīng)元及其連接分子）

發(fā)育生物學(xué)（逐個(gè)細(xì)胞繪制胚胎的整個(gè)發(fā)育過(guò)程）

單細(xì)胞組學(xué)（揭示組織樣本的細(xì)胞異質(zhì)性）

Elveflow 采用微液滴進(jìn)行單細(xì)胞包封的儀器配置如下：

  1. OB1 壓力控制器，至少有兩個(gè)      0–2000 mbar 通道

  2. 1 xMFS2 流量傳感器，0.4–7 μL/min，用于油相溶液

  3. 1 Xmfs3 流量傳感器      4.2–80 μL/min，用于細(xì)胞懸液

  4. 1 x 套件魯爾鎖啟動(dòng)連接件

  5. 2 x 15 mL 儲(chǔ)液管

  6. 具有疏水通道的微流控芯片

  7. 用于觀察的顯微鏡

  8. 用于成像的攝像頭（可選）

  9. HF5-7500 +      1 % FluoSurf表面活性劑

  10. Aquapel用于疏水處理（可選）

微流控芯片是微液滴單細(xì)胞包封的關(guān)鍵部件，可采用流動(dòng)聚焦的微流控微液滴生成芯片，材質(zhì)是PDMS ，微通道可以用Aquapel進(jìn)行處理，形成疏水性的微流體通道。

Fluidic 947 微液滴生成芯片，可獲得10-30μm的液滴。

Fludic 440 微液滴生成芯片，可獲得50-80μm的液滴

單細(xì)胞包封微流控芯片，生成20-50 μm的液滴。

這些芯片有2個(gè)入口，1個(gè)出口，入口分別是細(xì)胞懸浮液和油相，可實(shí)現(xiàn)單細(xì)胞包封。

如果想進(jìn)行單細(xì)胞包封后測(cè)序，可采用4個(gè)入口和1個(gè)出口的微流控芯片，4個(gè)入口分別用于細(xì)胞懸浮液，Barcoded 水凝膠珠，裂解緩沖液和油相。

例如采用細(xì)胞溶液,13.57X105細(xì)胞/ml, 生微液滴平均直徑為51.2μm（CV=2.4%）。

參考文獻(xiàn)：Collins. D et al (2015), “The Poisson distribution and beyond: methods for microfluidic droplet production and single cell encapsulation". Lab on a Chip, 15, 3439-3459. 
 
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